Размер вектора: с примерами. Просто и понятно!

Содержание

Требования для отправки векторных изображений в Adobe Stock

Хотите, чтобы ваше векторное изображение было принято в коллекцию Adobe Stock? Узнайте, как обеспечить соответствие нашим стандартам качества, техническим и юридическим требованиям, а также о том, как успешно загружать свои файлы.

Можно отправлять векторные изображения через портал Adobe Stock Contributor в форматах AI, EPS или SVG. Если вы отправляете иллюстрации, которые не являются векторными изображениями, см. раздел Требования к фотографиям и иллюстрациям. 

Предприятия, рекламные агентства, дизайнерские бюро и маркетологи хотят приобретать великолепные неповторимые стоковые векторные изображения, как эти:

Ниже приведены некоторые правила, которые помогут вам добиться успеха.

Компоненты изображения

Следует: без необходимости избегать использования текста, так как покупателям может потребоваться использовать другой шрифт.

Следует: как можно меньше использовать автотрассировку.

Не следует: добавлять растровые изображения (JPEG) в векторные файлы или растрировать какие-либо элементы.

Не следует: включать свою подпись или имя в иллюстрацию.

Контуры

Следует: использовать нужное количество опорных точек, не слишком много, чтобы форма не выглядела неровной, но и не слишком мало, чтобы линии не выглядели неестественно или плоско.

Следует: закрывать контуры всех заполненных фигур.

Следует: рассмотреть возможность использования различной толщины линий в изображении.

Следует: ознакомиться с документом Обучение и поддержка Illustrator в части руководств по созданию объемных изображений с использованием динамических символов.

Организация файла

Следует: добавлять метки слоев.

Следует: удалять скрытые и пустые слои.

Следует: удалять неиспользуемые элементы панели.

Следует: разблокировать все слои и подслои.

Следует: убедиться, что все иллюстрации выполнены в одной монтажной области, и удалить все, что находится за пределами монтажной области. 

Изменения

Следует: при желании загрузить до трех удачных вариантов каждого векторного изображения. Простые цветовые вариации не могут считаться удачными вариантами редактируемых векторных изображений. В вариациях должен осмысленным для потенциального покупателя образом различаться стиль, объект или композиция. Ниже приведен пример подходящего и неподходящего вариантов.

Не следует: загружать одно и то же изображение с разными видами линий или цветом фона.

Не следует: загружать одно и то же изображение с разными тенями, эффектами, а также зеркально отраженные изображения. Подробнее

Перед отправкой

Следует: просмотреть файл в режиме контуров, чтобы убедиться в том, что градиенты сохранили свою целостность и растровые изображения отсутствуют.

Следует: увеличить масштаб до 100 % или более и осмотреть изображение, чтобы убедиться в отсутствии случайных опорных точек или плохо соединенных линий.

Следует: отправлять релизы для любых соответствующих работ или узнаваемых людей или собственности, даже если узнаваемым человеком являетесь вы, а собственность принадлежит вам.

Следуйте этим техническим рекомендациям и передовым практикам.

Отправляйте систематизированные векторные файлы с осмысленно подписанными слоями и группами.
Отправляйте файлы в размере, соответствующем предполагаемому использованию.
Оптимизируйте опорные точки за счет упрощения контуров или объединения объектов.

Преобразуйте все штрихи в контуры или фигуры.
Текста должно быть минимальное количество, а имеющийся должен быть преобразован в кривые. 
Применяйте чистый фон, чтобы изображение проще было использовать и как векторное, и как JPEG-файл.

Ниже приведен пример отправленного материала с упорядоченными слоями и группами.

Вот еще несколько рекомендаций для успешного принятия отправленного материала.

Подробнее о технических рекомендациях по созданию первоклассных векторных изображений и о том, как использовать контуры, штрихи и опорные точки Adobe Illustrator для оптимизации файлов векторных изображений.

Установите соответствующий размер векторных изображений.

Хотя векторные изображения масштабируются, рекомендуется создавать их в целевом размере, чтобы пользователи могли работать с ними без изменения масштаба. Кроме того, пользователи могут загружать векторные файлы в формате JPEG, а небольшие векторные файлы будут загружаться как JPEG с низким разрешением, если они не в масштабе.

Для различных векторных файлов рекомендуется использовать размеры, описанные ниже.

Категория	Примеры контента	Минимальный размер	Максимальный размер
Элементы дизайна и их наборы	Значки, логотипы, узоры, символы, надписи	600 × 600 пикселов	4800×4800 пикселов
Сцены и иллюстрации	Символьные сцены, мультфильмы, цифровые изображения	1200×1200	4800×4800 пикселов
Макеты для малоформатной печати	Открытки, визитки, ярлыки	96×96 пикселов	3600×3600 пикселов
Макеты для крупноформатной печати	Флаеры, плакаты, конверты	2400×2400 пикселов	4800×4800 пикселов
Цифровые проекты небольшого размера	Наборы для социальных сетей, мобильные интерфейсы, мелкоформатные рекламные материалы	250×250 пикселов	3600×3600 пикселов
Цифровые проекты большого размера	Веб-макеты, настольные пользовательские интерфейсы, крупноформатная реклама	600 × 600 пикселов	7200×7200 пикселов

См. дополнительные подробные рекомендации по размерам для Adobe Stock.

Выберите один из двух способов загрузки векторных изображений.

Автономные векторные файлы (только в форматах AI, EPS и SVG)

В виде ZIP-папки (только форматы AI и EPS)

Папка с отправляемыми материалами должна включать только описанное ниже.

Файл формата AI или EPS с векторным изображением. (При сохранении убедитесь, что установлен флажок «Создать PDF-совместимый файл».)
Файл предварительного просмотра JPEG. (Размер файла: 4–100 МП.)

Размер папки: 4–100 МБ. 

Чтобы создать JPEG-файл для предварительного просмотра в Adobe Illustrator 

Выберите «Файл» ➞ «Цветовой режим документа» ➞ «Цвет RGB»
 Выберите «Файл» ➞ «Экспорт» ➞ «Сохранить для Интернета»
 Установки: JPEG, максимальный, качество 100 %
 Размер изображения: введите требуемый размер (минимальный размер файла: 15 МП)
 Сохраните в папку с AI-файлом

Ниже приведена инструкция по использованию функции «Сохранить для Интернета» для экспорта изображения предварительного просмотра.

Обратите внимание, что, если загружается файл в формате AI или EPS в качестве отдельного векторного объекта, возможно искажение цвета при просмотре изображения на портале Contributor или на веб-сайте Adobe Stock. Искажение цвета проявляется только при предварительном просмотре изображений. Чтобы избежать этого сдвига цветов, следует отправлять векторные изображения в виде ZIP-папок с изображениями предварительного просмотра JPEG в цветовом пространстве sRGB, как описано выше.

Используйте запоминающиеся заголовки и эффективные ключевые слова.

Если в вашем файле нет заголовка или встроенных ключевых слов, Adobe Stock будет использовать технологию Adobe Sensei, чтобы автоматически предлагать заголовок и до 25 ключевых слов в целях экономии вашего времени. Прочитайте ключевые слов, отредактируйте/удалите их, измените порядок по мере необходимости, а затем упорядочьте по степени важности, так как первые 10 перечисленных ключевых слов имеют приоритет в результатах поиска.

Если вы уже добавили заголовки и ключевые слова в изображения предварительного просмотра JPEG в Adobe Photoshop Lightroom, Lightroom Classic, Photoshop, Adobe Bridge или другом приложении для редактирования изображений, Adobe Stock сохранит их. Перед отправкой контента вы всегда сможете отредактировать такие метаданные.

Не используйте названия, защищенные товарным знаком (например, Porsche, iPad или Ferrari), характеристики фотокамеры (например, Nikon или 12MP) или виды контента (например, векторные изображения или иллюстрации) в качестве ключевых слов или заголовков.

Узнайте подробнее о добавлении заголовков и ключевых слов, а также см. примеры и дополнительную информацию в разделе «Иллюстрация» практического руководства для художников. 

Ознакомьтесь с основными юридическими требованиями.

Содержимое Adobe Stock должно соответствовать всем законам об авторском праве, товарных знаках, правах на неприкосновенность частной жизни, имущественных правах и т. д. Ознакомьтесь с разделом правовых рекомендаций данного руководства пользователя для того, чтобы понимать ключевые юридические термины и знать, когда нужно включать согласие на съемку человека и/или согласие владельца собственности на съемку при отправке своих материалов.

Необходимо учитывать несколько ключевых моментов.

При создании векторных изображений на основе фотографии или других художественных произведений необходимо предоставить согласие владельца собственности на съемку, даже если фотографии или художественные произведения принадлежат вам.
Мы не принимаем векторные изображения, содержащие логотипы, товарные знаки, названия компаний или торговых марок, однако можно отправить материал, в котором эти элементы были удалены цифровым образом. Иллюстрации с брендами или продуктами могут рассматриваться в качестве иллюстративных редакционных материалов.

Не отправляйте слишком много материалов (не спамьте).

Отбирайте только лучшие векторные изображения и убедитесь, что в каждом случае предлагаете что-то новое. Не следует отправлять несколько изображений с минимальными вариациями. Отправка нескольких копий аналогичного или схожего контента может быть расценена нашими специалистами как спам. Использование длинных, не описательных, повторяющихся или не относящихся к делу заголовков и ключевых слов также может быть расценено как спам. Спаминг строго запрещен и может привести к блокировке вашей учетной записи или ее окончательному закрытию. Подробнее

Adobe Artists: Надежда | 310890179, симпатичные дизайны | 338373670, Екатерина | 419405286

3.6 Размер вектора. Как его уменьшить

На стоках существует ограничение на размер файла EPS или ZIP архива, на каждом микростоке оно разное, но так или иначе мы должны следить за размером файла.

Отчего зависит размер файла? Возможно ли его уменьшить?

В первую очередь для сокращения размеры вам необходимо удалить все лишние кисти, образцы цвета, стили и символы (палитры: Brushes, Swatches, Graphic Styles, Symbol), так как они сохраняются именно в файле и, соответственно, увеличивают его вес.

Как удалить лишние образцы цвета, кистей, стилей и символов?

Образцы удаляются очень просто. Откройте EPS, вызовите соответствующую палитру (Brushes, Swatches, Graphic Styles, Symbol), щелкните по образцу, который хотите удалить, а затем на корзину в правом-нижнем углу палитры. Если надо удалить несколько образцов — щелкаете с нажатой клавишей Ctrl (для выделения нескольких в разных местах) или Shift (для выделения образцов идущих подряд). После этого щелкаете по корзине. При каждом щелчке на корзину будет выдаваться запрос, действительно ли вы желаете удалить образец, нажатие клавиши Alt избавит вас от этого диалога.

Как удалить все неиспользуемые образцы?

В правом-верхем углу соответствующей палитры (Swatches, Brushes, Graphic Styles, Symbol) под треугольником есть еще одна полезная команда: Select All Unused. С ее помощью можно выделить все образцы, которые не используются в сохраняемой работе и удалить их.

После удаления лишних образцов кистей, цвета, стилей и символов сохраните EPS файл, больше в нем их содержаться не будет. Но во вновь создаваемом файле образцы появятся вновь, т. к. информация о наполнении содержится в темплейтах, на них тоже можно воздействовать (но разговор об этом пойдет в другой раз)

Удаление неиспользуемых кистей и образцов уменьшает размер файла, но не всегда значительно, скорее их следует удалять из соображений аккуратности и профессионализма: покупатель, приобретая вашу работу с ненужными и не учавствующими элементами в дизайне, может задуматься о вашей компетентности.

Отчего еще может зависеть размер файла?

Растрированные объекты. Если ваш векторый файл весит 10-20Mb и более, то в 99% случаев он содержит растрированные объекты. Откройте ваш готовый EPS, вызовите палитру Links (Window — Links) и проверьте, нет ли там каких-либо элементов.

На примере вверху к контуру рыбки применен эффект, которые содержал неподдерживаемые EPS элементы, поэтому при сохранении они растрировались. На первый взгляд файл содержит только контур и градиент, но при этом весит около 8 Mb. Палитра Links сразу покажет, сколько в файле растрированных областей. Все они должны быть найдены и удалены. В палитре Links не должно быть НИЧЕГО!

Огромное количество объектов или узлов. Подобное часто встречается при трассировке или экспанде какого-то сложного эффекта, при этом рисунок может содержать до 5-10000 объектов и 20 000 и более узлов.

Как их посчитать сколько объектов и узлов? Включить палитру Document Info (Меню Window — Document Info). А затем в этой палитре нажать на треугольник в правом-верхнем углу и снять галочку Selection Only (Только выбранные) и поставьте галочку напротив Objects.

В примере файл состоит почти из 5000 объектов и почти 30 000 узлов. Объем файла — 5 мегабайт.

Слишком много Бленда (Blend пошаговые переходы).На примере рисунок содержит 14 цветков по 5 лепестков, каждый лепесток в свою очередь бленд, в итоге файл занимает 5,5 Mb. В данном примере использование пошаговых переходов неоправданно, в место них можно использовать градиенты.

Размер такого файла стал 263 Kb.

Большое количество шагов в Бленде. Чем больше шагов — тем больше размер файла. Пример: изображение компакт-диска, радужные лучи созданы двумя окружностями с линейными градиентами цветов радуги, между ними бленд.

Если количество шагов в Blend 50 — файл занимает около 300 Kb, при 100 шагах — 350 Kb, при 200 — около 400 Кb. Количество шагов в данном случае влияет на плавность перетекания цветов и отсутствие полос.

Сложная форма бленда.

Бленд многоконечной звезды увеличивает вес рисунка практически в два раза по сравнению с блендом двух окружностей.

Использование Mesh, особенно с большим количеством точек на сетке.

Mesh-сетка в 4 строки и 50 столбцов — 3,3 Mb.

Умножьте один параметр на другой, например, множество объектов с мешем, сложным блендом, прозрачность и режимом наложения, вот и получится гигантские размеры файлов. Теперь вы знаете, как их уменьшать.

Эта страница была показана 3563 раза.

Пожалуйста, поделитесь, если страница оказалась полезной!

Требования для добавления векторной графики в Adobe Stock

Хотите, чтобы ваша векторная графика была принята в коллекцию Adobe Stock? Узнайте, как обеспечить соответствие нашим стандартам качества, а также техническим и юридическим требованиям, и узнайте, как успешно загружать файлы.

Предприятия, рекламные агентства, дизайн-студии и маркетологи хотят покупать великолепные, отличительные векторные изображения, например:0002

Компоненты изображения

Сделайте : Избегайте текста, если он не является необходимой частью вашей композиции, поскольку покупателям может потребоваться выбрать замещающий шрифт.

Сделайте : Сведите использование автоматической трассировки к минимуму.

Не : добавьте растровые изображения (JPEG) в векторные файлы или растрируйте любые элементы.

Не : Включите свою подпись или имя в произведение искусства.

Пути

Сделайте : Используйте правильное количество опорных точек — не так много, чтобы фигура стала неровной, и не так мало, чтобы кривые выглядели неестественно или плоско.

Выполнить : Закрыть пути для всех фигур с заливкой.

Сделайте : рассмотрите возможность использования различных толщин обводки на изображении.

Сделать : Загляните в Illustrator Learning & Support, чтобы получить учебные пособия по различным темам: от создания изображений с фигурами до использования динамических символов.

Организация файла

Выполните : Назовите слои.

Выполнить : удалить скрытые и пустые слои.

Выполнить : удалить неиспользуемые элементы панели.

Выполнить : Разблокировать все слои и подслои.

Сделайте : Убедитесь, что все ваши рисунки находятся на одной монтажной области, и удалите все, что находится за пределами монтажной области.

Варианты

Выполните : Загрузите до трех значимых вариантов каждого вектора, если хотите. Простые цветовые вариации не считаются значимыми вариациями для редактируемых векторов. Варианты должны изменить стиль, тему или состав файла таким образом, чтобы он был полезен потенциальному покупателю. Узнать больше

Не следует: Загружать одно и то же изображение с разными типами обводки или цветом фона.

Не следует: Загружать одно и то же изображение с разными тенями, эффектами или перевернутыми изображениями.

Вот пример приемлемого и неприемлемого вариантов:

Перед отправкой и нет растровых изображений.

Сделайте : Увеличьте масштаб до 100 % или ближе и осмотрите изображение, чтобы убедиться, что оно не содержит случайных опорных точек или плохо соединенных линий.

Выполните : Отправьте формы разрешения для любого используемого справочного материала или узнаваемых людей или имущества, даже если узнаваемым лицом являетесь вы или имущество принадлежит вам.

Отправьте со следующими техническими рекомендациями:

Только форматы AI, EPS и SVG
Рекомендуемый минимум монтажной области: 15MP (мегапикселей)
Максимальное разрешение монтажной области: 65MP (мегапикселей)
Максимальный размер файла: 45 МБ (мегабайт)
Цветовой режим документа: RGB
Смещение монтажной области: (0,0) верхний левый угол

Файлы EPS следует либо экспортировать с разрешением более 15 МП, либо экспортировать с предустановками прозрачности «Высокое разрешение», чтобы изображения для предварительного просмотра отображались с оптимальным качеством. Файлы EPS размером более 15 Мп могут экспортировать пресеты прозрачности EPS с плотностью 72 пикселей на дюйм, чтобы они оставались меньше максимального размера файла 45 МБ.

Узнайте больше о вариантах экспорта векторов здесь.

Следуйте этим рекомендациям:

Отправляйте упорядоченные векторные файлы с полезными помеченными слоями и группами.
Отправьте размеры, точные для предполагаемого использования файла.
Оптимизируйте опорные точки, упростив пути или объединив объекты.
Обведите все штрихи в виде контуров или фигур.
Текст должен быть минимизирован, но при включении обведен контуром.
Подгонка монтажной области под арт.
Удалите фон или используйте чистый фон, чтобы клиентам было легко загрузить актив и использовать его в виде файла вектора, PNG или JPG.

Вот пример отправки с хорошо организованными слоями и группами:

А вот еще несколько рекомендаций для успешной отправки:

Узнайте больше о передовых технических методах создания великолепных векторов и узнайте, как использовать Adobe Пути, штрихи и опорные точки Illustrator для оптимизации векторных файлов.

Правильный размер векторов.

Хотя векторы можно масштабировать, мы рекомендуем создавать их в пригодных для использования размерах, чтобы клиенты могли редактировать их как есть. Клиенты смогут загружать векторные файлы в форматах PNG и JPEG, а небольшие векторные файлы будут загружаться как изображения с низким разрешением, если не в масштабе.

Категория	Примеры содержания	Минимальный размер	Максимальный размер
Элементы дизайна и наборы	Значки, логотипы, узоры, символы, надписи	1000×1000 пикселей	4800×4800 пикселей
Сцены и иллюстрации	Сцены с персонажами, мультфильмы, цифровые изображения	1200×1200 пикселей	4800×4800 пикселей
Макеты с мелким шрифтом	Открытки, визитки, ярлыки	1000×1000 пикселей	3600×3600 пикселей
Большие макеты для печати	Листовки, плакаты, конверты	2400×2400 пикселей	4800×4800 пикселей
Маленькие цифровые конструкции	Социальные сети, мобильный пользовательский интерфейс, небольшая реклама	1000×1000 пикселей	3600 x 3600 пикселей
Большой цифровой дизайн	Веб-макеты, настольные пользовательские интерфейсы, большие объявления	1200×1200 пикселей	7200×7200 пикселей

Получите более подробные рекомендации по размеру от Adobe Stock.

Используйте эффективные заголовки и ключевые слова.

Если у вашего файла нет заголовка или каких-либо встроенных ключевых слов, Adobe Stock будет использовать технологию Adobe Sensei, чтобы автоматически предлагать заголовок и до 25 ключевых слов, чтобы сэкономить ваше время. Прочитайте их и отредактируйте, измените порядок или удалите ключевые слова по мере необходимости, а затем расположите их в порядке важности, так как первые 10 перечисленных ключевых слов имеют приоритет в результатах поиска.

Если вы уже добавили заголовки и ключевые слова к изображениям предварительного просмотра в формате JPEG в Adobe Photoshop Lightroom, Lightroom Classic, Photoshop, Adobe Bridge или другом приложении для редактирования изображений, Adobe Stock сохранит их. Вы всегда можете отредактировать эти метаданные перед отправкой контента.

Не используйте названия товарных знаков (например, Porsche, iPad или Ferrari), характеристики камеры (например, Nikon или 12MP) или типы контента (например, вектор или иллюстрацию) в качестве ключевых слов или в заголовке.

Узнайте больше о названиях и ключевых словах или см. раздел Иллюстрация в справочнике исполнителя для получения примеров и дополнительной информации.

Знать основы законодательства.

Содержимое Adobe Stock должно соответствовать всем законам, касающимся авторского права, товарных знаков, прав на неприкосновенность частной жизни, прав собственности и многого другого. Просмотрите Юридические рекомендации раздел данного руководства пользователя, чтобы убедиться, что вы понимаете ключевые юридические термины и знаете, когда вам необходимо включить разрешение модели и/или разрешение собственности в вашу заявку.

Пара ключевых моментов, которые нужно знать:

Если вы создаете векторную графику на основе фотографии или произведения искусства, вам необходимо предоставить разрешение на собственность, даже если фотография или иллюстрация являются вашей собственной работой.
Мы не принимаем векторы, содержащие логотипы, товарные знаки, названия компаний или торговые марки. — хотя вы можете отправить работу, в которой эти вещи были удалены в цифровом виде. Иллюстрации с изображением брендов или продуктов могут рассматриваться как иллюстративные редакционные материалы.

Будьте осторожны, не спамьте.

Выберите только лучшие векторы и убедитесь, что каждая отправка предлагает что-то свое. Не отправляйте несколько изображений с минимальными изменениями. Отправка нескольких копий похожего или идентичного контента может быть воспринята нашей командой модераторов как спам. Использование длинных, не описательных, повторяющихся или нерелевантных заголовков и ключевых слов также может быть воспринято как спам. Рассылка спама строго запрещена и может привести к тому, что мы заблокируем вашу учетную запись или закроем ее навсегда. Узнать больше

Экспортированные изображения для предварительного просмотра, включенные в заархивированные папки, больше не обрабатываются через портал авторов. Мы рекомендуем загружать только отдельные файлы AI, EPS или SVG. Изображения для предварительного просмотра будут автоматически сгенерированы из этих векторных файлов, поэтому обязательно соблюдайте приведенные выше технические рекомендации по отправке, чтобы избежать каких-либо проблем с созданием изображений для предварительного просмотра.

Adobe Artists:

Надежда | 3108, Симпатичные дизайны | 338373670, Катерина | 419405286, макровектор | 384104080

Влияние размера генома на векторную упаковку AAV

Сохранить цитату в файл

Формат: Резюме (текст)PubMedPMIDAbstract (текст)CSV

Добавить в коллекции

Создать новую коллекцию
Добавить в существующую коллекцию

Назовите свою коллекцию:

Имя должно содержать менее 100 символов

Выберите коллекцию:

Невозможно загрузить вашу коллекцию из-за ошибки
Повторите попытку

Добавить в мою библиографию

Моя библиография

Не удалось загрузить делегатов из-за ошибки
Повторите попытку

Ваш сохраненный поиск

Название сохраненного поиска:

Условия поиска:

Тестовые условия поиска

Электронное письмо: (изменить)

Который день? Первое воскресеньеПервый понедельникПервый вторникПервая средаПервый четвергПервая пятницаПервая субботаПервый деньПервый рабочий день

Который день? ВоскресеньеПонедельникВторникСредаЧетвергПятницаСуббота

Формат отчета: SummarySummary (text)AbstractAbstract (text)PubMed

Отправить максимум: 1 шт. 5 шт. 10 шт. 20 шт. 50 шт. 100 шт. 200 шт.

Отправить, даже если нет новых результатов

Необязательный текст в электронном письме:

Создайте файл для внешнего программного обеспечения для управления цитированием

. 2010 Январь; 18 (1): 80-6.

doi: 10.1038/mt.2009.255. Epub 2009 10 ноября.

Чжицзян Ву ¹ , Хунъян Ян, Питер Колози

принадлежность

¹ Лаборатория генной терапии глаз, Лаборатория нейробиологии, нейродегенерации и репарации, Национальный глазной институт, Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд 20892, США.

PMID: 194
PMCID: PMC2839202
DOI: 10. 1038/т.2009.255

Бесплатная статья ЧВК

Zhijian Wu et al. Мол Тер. 2010 9 января0004

Бесплатная статья ЧВК

. 2010 Январь; 18 (1): 80-6.

doi: 10.1038/mt.2009.255. Epub 2009 10 ноября.

Авторы

Чжицзян Ву ¹, Хунъян Ян, Питер Колози

принадлежность

¹ Лаборатория генной терапии глаз, Лаборатория нейробиологии, нейродегенерации и репарации, Национальный глазной институт, Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд 20892, США.

PMID: 194
PMCID: PMC2839202
DOI: 10.1038/т.2009.255

Абстрактный

Длина векторных геномов аденоассоциированного вируса (AAV) была ограничена 5 килобазами (т.п.н.), поскольку считалось, что предел их упаковки аналогичен размеру родительского генома AAV. В недавних сообщениях утверждается, что значительно большие векторные геномы могут быть упакованы без изменений. Мы исследовали упакованные векторные геномы из кодируемых плазмидами векторов AAV длиной от 4,7 до 8,7 т.п.н. с использованием капсидов AAV типов 2, 5 и 8. Саузерн-блоттинг показал, что упакованные геномы векторов AAV никогда не превышали 5,2 т. п.о. в длину, независимо от размера кодируемого плазмидой вектора или типа капсида. Этот результат был подтвержден зондированием генома вектора с помощью специфичных для цепи олигонуклеотидов. Упакованные векторные геномы, полученные из кодируемых плазмидами векторов размером более 5 т.п.н., были гетерогенными по длине и усеченными на 5′-конце. Несмотря на их укороченные геномы, векторные препараты, полученные из кодируемых плазмидами векторов размером более 5,2 т.п.н., опосредовали экспрессию репортерного гена in vitro при высокой множественности заражения (MOI). Эффективность экспрессии была существенно ниже, чем у репортерных векторов с длиной генома <5 т.п.н. Мы предполагаем, что транскрипционно функциональные, интактные векторные геномы генерируются в клетках, трансдуцированных с высоким MOI из фрагментарных геномов этих более крупных векторов, вероятно, путем рекомбинации.

Цифры

Рисунок 1

Электрофорез векторов AAV-mCEP290. (…

Рисунок 1

Электрофорез векторов AAV-mCEP290. ( a ) Структура мыши AAV CEP290…

Рисунок 1
Электрофорез векторов AAV-mCEP290. ( a ) Структура вектора CEP290 мыши AAV. ( b ) Щелочной агарозный электрофорез и Саузерн-блот-анализ выделенных векторных геномов AAV mCEP290. Дорожки 1 и 2: маркер векторной плазмидной ДНК длиной 8343 п.н., 0,1 и 1 нг соответственно; дорожки 3 и 4: маркер векторной плазмидной ДНК длиной 5067 п.н., 0,1 и 1 нг соответственно; дорожки 5–7: ДНК из 1 × 10 ¹⁰ векторных геномов, выделенных из AAV2 mCEP290, AAV5 mCEP290 и векторные препараты AAV8 mCEP290 соответственно. AAV, аденоассоциированный вирус; п.н., пара оснований; ЦМВ, цитомегаловирус; ITR, перевернутый терминальный повтор; кб, килобаза.
Рисунок 2
Целостность генома вектора AAV5-mCEP290…
Рисунок 2
Целостность генома вектора AAV5-mCEP290. ( a ) Положения гибридизации одноцепочечных олигонуклеотидов…
Рисунок 2
Целостность генома вектора AAV5-mCEP290. ( a ) Положения гибридизации одноцепочечных олигонуклеотидов в геноме вектора. ( b ) Специфическая для цепи дот-блот-гибридизация векторной геномной ДНК. Двукратные серийные разведения векторной плазмидной ДНК (верхний ряд) и выделенной векторной ДНК генома AAV5 mCEP290 (нижний ряд). Массы векторных плазмидных ДНК составляют 50, 25, 12,5, 6,25, 3,1, 1,6, 0,78 и 0,39.нг (лунки 1–8, верхний ряд). Расчетные массы выделенных векторных ДНК составляют 7, 3,5, 1,7, 0,86, 0,43, 0,21, 0,11 и 0,05 нг (лунки 1–8, нижний ряд). ДНК в первой лунке нижнего ряда была выделена из 2,3 × 10 ⁹ векторных геномов.
Рисунок 3
Упаковка AAV2 и AAV5…
Рисунок 3
Упаковка векторов AAV2 и AAV5 lacZ. ( a ) Структуры кодируемых плазмидой…
Рисунок 3
Упаковка векторов AAV2 и AAV5 lacZ. ( a ) Структуры кодируемых плазмидами векторов размером от 4,7 до 8,7 т.п.н. Все эти векторы содержали экспрессионную кассету CMV lacZ размером 4,4 т.п.н., расположенную рядом с ITR (обозначение I в названии) или в центре (обозначение C в названии), и ДНК фага лямбда использовали для увеличения общей длины. ( b ) Саузерн-блот-анализ выделенной ДНК генома вектора, разделенной на щелочном агарозном геле. 1 × 10 ¹⁰ векторных генома были проанализированы для векторов AAV5 (верхняя панель) и 1 × 10 ⁹ векторных генома были проанализированы для векторов AAV2 (нижняя панель). Маркеры векторной плазмидной ДНК на дорожках M1: 8,6 т.п.н. (1 нг), M2: 5,1 т.п.н. (1 нг), M3: 8,6 т.п.н. (0,1 нг) и M4 5,1 т.п.н. (0,1 нг). ДНК в M2 является непреднамеренным частичным перевариванием. Дорожки 1–8 на обеих панелях: геномы, выделенные из AAV-lacZ-4.7k, AAV-lacZ-I5.2k, AAV-lacZ-I5.7k, AAV-lacZ-I6.7k, AAV-lacZ-I8.7k, Векторные препараты AAV-lacZ-C5.7k, AAV-lacZ-C6.7k и AAV-lacZ-C8.7k соответственно. ЦМВ, цитомегаловирус; ITR, перевернутый терминальный повтор; кб, килобаза.
Рисунок 4
Экспрессия LacZ в клетках 293…
Рисунок 4
Экспрессия LacZ в клетках 293, инфицированных векторами AAV2-lacZ. ( и ) ЛакЗ…
Рисунок 4
Экспрессия LacZ в клетках 293, инфицированных векторами AAV2-lacZ. ( a ) Экспрессия LacZ в 293 клетках, инфицированных векторами AAV2-lacZ, при множественности множественности 2000 (левые панели) или 10000 (правые панели). ( b ) Количественная оценка трансдукции набора векторов AAV2 lacZ. MOI, множественность инфекции.
Рисунок 5
Предлагаемая модель для упаковки и…
Рисунок 5
Предлагаемая модель упаковки и трансдукции векторов AAV2 lacZ. (1) Упаковка, (2)…
Рисунок 5
Предлагаемая модель упаковки и трансдукции векторов AAV2 lacZ. (1) упаковка, (2) снятие покрытия, (3) синтез второй цепи ДНК, (4) отжиг и (5) гомологичная рекомбинация.
Рисунок 6
Предлагаемая модель фрагментарного генома…
Рисунок 6
Предлагаемая модель трансдукции фрагментарного генома. Правая панель: один ITR и неповрежденный лак…
Рисунок 6
Предлагаемая модель трансдукции фрагментарного генома. Правая панель: одна ITR и неповрежденная кассета lacZ, содержащая фрагмент ДНК длиной <5050 п.н. Левая панель: неповрежденная кассета lacZ и любой ITR, содержащийся во фрагменте ДНК длиной >5050 п.н. Более высокая эффективность трансдукции векторов с ITR-проксимальными кассетами экспрессии lacZ может указывать на то, что эти векторы упаковывают первые 5050 п.н. с 3′-конца, которые кодируют одну ITR и интактную экспрессию lacZ, и что этот фрагментарный геном способен опосредовать экспрессию генов без необходимости отжига ко второму вектору. п.н., пара оснований; ЦМВ, цитомегаловирус; ITR, перевернутый терминальный повтор.
См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC
Похожие статьи
Количественный анализ упаковочной способности рекомбинантного аденоассоциированного вируса.
Донг Й.Ю., Фан Фан, Фризелл Р.А. Донг Дж.И. и др. Гул Джин Тер. 1996 10 ноября; 7 (17): 2101-12. doi: 10.1089/hum.1996.7.17-2101. Гул Джин Тер. 1996. PMID: 8934224
Характеристика целостности генома рекомбинантного вектора AAV большого размера.
Донг Б., Накай Х., Сяо В. Донг Б. и др. Мол Тер. 2010 Январь; 18 (1): 87-92. doi: 10.1038/mt.2009.258. Epub 2009 10 ноября. Мол Тер. 2010. PMID: 196 Бесплатная статья ЧВК.
Упаковочная способность серотипов аденоассоциированных вирусов: влияние более крупных геномов на инфекционность и этапы после проникновения.
Григер Ю.С., Самульский Р.Ю. Григер Дж. К. и соавт. Дж Вирол. 2005 г., август; 79 (15): 9933-44. doi: 10. 1128/ОВИ.79.15.9933-9944.2005. Дж Вирол. 2005. PMID: 16014954 Бесплатная статья ЧВК.
Экспрессия трансгенов, которые превышают упаковочную способность аденоассоциированных вирусных капсидов.
Чемберлен К., Рияд Дж. М., Вебер Т. Чемберлен К. и др. Hum Gene Ther Methods. 2016 фев; 27(1):1-12. дои: 10.1089/hgtb.2015.140. Hum Gene Ther Methods. 2016. PMID: 26757051 Бесплатная статья ЧВК. Рассмотрение.
Интеграция аденоассоциированного вирусного вектора.
Дейл Д.Р., Рассел Д.В. Дейл Д.Р. и соавт. Curr Opin Mol Ther. 2009 авг; 11 (4): 442-7. Curr Opin Mol Ther. 2009. PMID: 19649989 Бесплатная статья ЧВК. Рассмотрение.
Посмотреть все похожие статьи
Цитируется
Оценка изменчивости продукции пустых и заполненных аденоассоциированных вирусов с помощью анализа массы отдельных молекул.
Ebberink EHTM, Ruisinger A, Nuebel M, Thomann M, Heck AJR. Эбберинк EHTM и др. Mol Ther Methods Clin Dev. 2022 15 ноября; 27: 491-501. doi: 10.1016/j.omtm.2022.11.003. электронная коллекция 2022 8 декабря. Mol Ther Methods Clin Dev. 2022. PMID: 36458114 Бесплатная статья ЧВК.
Митохондриально-направленная РНК-терапия как потенциальная стратегия лечения митохондриальных заболеваний.
Чернега Т., Чой Дж., Салмена Л., Андреацца А.С. Чернега Т. и др. Молекулярные нуклеиновые кислоты. 2022 27 октября; 30: 359-377. doi: 10.1016/j.omtn.2022.10.012. Электронная коллекция 2022 13 декабря. Молекулярные нуклеиновые кислоты. 2022. PMID: 36420220 Бесплатная статья ЧВК. Рассмотрение.
Неравномерная повторная экспрессия дистрофина после CRISPR-опосредованной эксцизии экзона в мышиной модели МДД с двойным нокаутом дистрофина/атрофина.
Хэнсон Б., Стенлер С., Альског Н., Чваления К., Сврзикапа Н., Коэнен-Стасс АМЛ, Вайнберг М.С., Вуд М.Дж.А., Робертс Т.С. Хэнсон Б. и др. Молекулярные нуклеиновые кислоты. 2022 23 октября; 30: 379-397. doi: 10.1016/j.omtn.2022.10.010. Электронная коллекция 2022 13 декабря. Молекулярные нуклеиновые кислоты. 2022. PMID: 36420212 Бесплатная статья ЧВК.
Наночастицы, нацеленные на гемопоэтические стволовые клетки и клетки-предшественники: мультимодальные носители для лечения гематологических заболеваний.
Круз Л.Дж., Резаи С., Гросвельд Ф., Филипсен С., Эйх К. Круз Л.Дж. и соавт. Передний геном Эд. 2022 2 ноября; 4:1030285. doi: 10.3389/fgeed.2022.1030285. Электронная коллекция 2022. Передний геном Эд. 2022. PMID: 36407494 Бесплатная статья ЧВК. Рассмотрение.
Достижения в подходах к изучению специфических корковых цепей клеточного типа на протяжении всего развития.
No related posts.